生物标本的超分辨率成像
传统的光学显微镜技术,如共焦显微镜和宽视场显微镜,其衍射分辨率受到限制,横向(xy)约为200nm,轴向(z)约为500-600nm,接近衍射限的特征在图像中会显得模糊,接下来小编将去介绍生物标本的超分辨率成像。
超分辨技术要么超过衍射限,要么绕过衍射限,从而使以前只能用电子显微镜(EM)观察的生物样品的结构成像成为可能,此外,在亚衍射分辨率下,用超分辨率技术进行活体样品成像是可能的,而用电磁法几乎是不可能的。
大体上有三种不同类型的超分辨显微镜:结构光显微镜(SIM)、受激发射损耗显微镜(STED)和单分子定位显微镜(SML),利用莫尔条纹和傅里叶变换,SIM的分辨率可以提高两倍。
TED使用点扩散函数工程来减小衍射限制点的尺寸,从而使分辨率提高5到10倍,SML技术依赖于定位样品中一系列随机激活的分子子集的位置,从而实现横向高达20纳米和轴向高达50纳米的分辨率。
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