生物标本在电镜研究下的状态
谈到扫描电镜的生物标本,过去必须先将其固定并脱水,然后在空气中或使用液态二氧化碳(临界点干燥)将其干燥,一的例外是,没有这种处理的物体足够坚固,可以承受真空——例如花粉粒和有坚硬外骨骼的昆虫。
现代扫描电镜研究的选择技术是超低温保存,该物体在大约-200摄氏度的温度下被投入液态氮和固态氮的混合物中迅速冻结,这会导致物体表面几乎瞬间冻结,并防止其变形,然后将物体直接转移到扫描电镜内的一个特殊的试样台上,扫描电镜也被液氮冷却。
为了实现有机材料二次电子的良好发射,并防止检测过程中表面电荷的积聚,通常用非常薄的一层金或金钯合金对试样进行包覆,对于干燥的样品,这种涂层可以在真空蒸发器中沉积,冷冻标本通常被包裹在一个特殊的小室里,小室连接在显微镜柱上,并与冷却系统相连。
与传统的化学固定和干燥相比,低温保存确实有一些缺点,这些冷冻设备的购买和运行成本很高,显微镜内的样品台必须冷却到非常低的温度,这会降低其机械稳定性,与环境温度下的操作相比,试样台的移动也可能受到限制。
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