扫描电镜用于EDS的生物标本制备
利用电子显微镜对生物标本进行成像有许多挑战,其中大多数也适用于能量色散X射线光谱法(EDS),电子显微镜内部是一个恶劣的生命环境,真空和高能电子束对大多数生物样品中的软材料都具有破坏性。
作为生物学家,我们希望捕捉尽可能接近生命状态的数据,这意味着要小心保存我们的标本,避免改变它们的结构和内容,当我们需要保存元素成分时,这一点尤为重要。
电子显微镜需要显微镜内部一定程度的真空,这反过来要求所有样品脱水、干燥或冷冻,以避免暴露时水分蒸发和样品变形,脱水会导致细胞和组织中的结构和分子聚集在一起,在脱水之前,必须通过一个称为固定的过程来固定它们的相对位置。
生物标本的性质是三维的,这使EDS数据的收集变得复杂,EDS探测器通常位于显微镜室的一侧,不均匀或弯曲的样品会造成人造阴影,从探测器发射的x射线很可能被样品吸收,从而导致计数率低于面向探测器的一侧。
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